11 Corso di Aggiornamento in Oncologia ed Ematologia 18 maggio 2013 Sestri Levante
Percorsi diagnostici nelle neoplasie ematologiche (WHO-2008) Dott.ssa Donatella Tanca
Chicago, Feb. 2007
WHO/Clinical Advisory Meeting Chicago, Feb. 2007
WHO classification of neoplastic hematologic diseases • Disease entities are defined by a combination of different diagnostic parameters which include both laboratory and clinical data • The relative importance of each of them varies among diseases with no predefined “gold standard” • This is particularly true in myeloid neoplasms, a group which greatly benefits from such an “integrated approach ”
PERCORSO DIAGNOSTICO PROCESSO SISTEMATICO CHE IMPONE L’INTEGRAZIONE DI DATI CLINICI, MORFOLOGICI, CITOCHIMICI, IMMUNOFENOTIPICI E GENOTIPICI
PERCORSO DIAGNOSTICO IN LABORATORIO DATI NUMERICI
INTERPRETAZIONE (ANIMAZIONE)
reperto
INTERPRETAZIONE (ANIMAZIONE)
REFERTO
reperto
“Il referto è l’interpretazione del reperto” Prof Burlina
Il laboratorio deve fare diagnosi Nostri strumenti : 1. Colloquio con il clinico e medico di base 2. Dati anamnestici sintomi e segni 3. Numeri e flags strumentali 4. Osservazioni della microscopia ottica s.p., midollo 5. Citochimica 6. Citometria 7.Citogenetica Biologia molecolare
(Malattie linfoproliferative) neoplasie a cellule B e T/NK mature Gruppo eterogeneo di disordini, caratterizzati dalla proliferazione neoplastica di elementi linfoidi a fenotipo B o T o NK che possono interessare midollo,linfonodi, sangue periferico e altri organi con aspetti morfologici e clinici vari
Classificazione delle leucemie croniche B • Leucemia linfatica cronica tipica atipica • Leucemia prolinfocitica • Leucemia ad “hairy cell” forma classica forma variante (linfoma/leucemia splenici a cellule B,non classificabili)
WHO 2008 MORFOLOGIA IMMUNOFENOTIPO (ASPIRATO MIDOLLARE) (solo in citopenie e prima di iniziare terapia) BIOPSIA OSTEO MIDOLLARE BIOPSIA LINFONODO (CITOCHIMICA) CITOGENETICA MOLECOLARE.
Leucemia linfatica cronica B CARATTERIZZATA DA UNA ESPANSIONE DI CELLULE B MATURE POSTCENTRO GERMINATIVO (B-MEMORIA) MUTATE O NON MUTATE DELEZIONI O TRISOMIE NO TRASLOCAZIONI
Leucemia linfatica cronica B ESPANSIONE DI CELLULE B MATURE CON CARATTERISTICHE MORFOLOGICHE ED IMMUNOFENOTIPICHE, CHE MOLTO SPESSO SONO PRECEDUTE DA UNA LINFOCITOSI MONOCLONALE B (MBL)
Striscio periferico
Criteri diagnostici (Cheson BD et al. Blood 1996; 87:4990-7)
• Linfocitosi > (5 x 109/L) 4 x 109/L • Marker B (CD19, CD23, CD5) ,con restrizione clonale • Cellule atipiche < 55 (%) • Linfociti midollari > 30 (%) ? WHO 2008 • LLC-B:Linfociti B: > 5x109/L
Criteri diagnostici immunofenotipici Bassa espressione SmIg :1 CD5+ :1 CD23+ :1 FMC7:1 CD79b:1 Score >4 =LLC-B
Leucemia linfatica monoclonale B (MBL) * Linfociti B: >0.49x109/L< 5x109/L * Clonalità kappa o lambda * Linfocitosi persistente > tre mesi *Assenza di linfoadenomegalie, epatosplenomegalie,malattie autoimmuni infezioni,sospetti di linfomi.
LLC tipica
CD19 + CD5 + CD23 + CD20+dim CD22 - o +dim CD38 - o + Kappa / Lambda Igs dim
Anomalie forma tipica: 13q14 del(11q)
LLC atipica CD19 ++ CD5 ++ CD23 ++ CD20++ bright CD22 ++bright CD11c+ CD38 - o + Kappa / Lambda Igs bright
Anomalie forma atipica: trisomia 12 Anomalie TP53 del(6q)
LEUCEMIA PROLINFOCITICA (> 55% prolinfociti) Linfociti B piu’ maturi di quelli della LLC
LEUCEMIA PROLINFOCITICA CD19 ++ Linfocitosi elevate (> 55% prolinfociti) CD5 -/+ Anemia neutropenia Piastrinopenia
CD23 –
Splenomegalia,no linfoadenomegalia
CD20++ CD22 ++ CD11c++ CD25CD11c+ CD38 Lambda/Kappa Igs intensa
trisomia 3 monosomia 7 del(7q), del(11)(q23) del(13)(q14) Varie traslocazioni
LEUCEMIA AD “HAIRY CELL”
forma classica sottopolazione di linfociti B maturi B-memoria attivati
LEUCEMIA AD “HAIRY CELL”
forma classica
CD19 ++ CD5 CD23 CD22 ++
Pancitopenia
CD20++
Leucopenia
CD38 -/+
Monocitopenia
CD25 ++
Splenomegalia
CD11c ++
(polpa rossa)
CD103 ++ CD123+ Kappa/Lambda Igs intensa Trisomia 5 Trisomia 6 Monosomia 10,17 Trisomia 12
LEUCEMIA AD “HAIRY CELL”
forma variante (B-linfocita attivato maturo)
CD19 ++ CD5 CD23 CD22 ++ CD20++
Leucocitosi
CD38 -/+
Monociti normali
CD25 -
Anemia
CD11c -/+
Trombocitopenia
CD103 ++ CD123Kappa/Lambda Igs intensa
del TP53
FASE LEUCEMICA DI LINFOMA NON HODGKIN (> 5 x 109/L cellule linfoidi anomale >4x 109/L circolanti)
• • • • • • •
Linfoma splenico con linfociti villosi circolanti Linfoma follicolare Linfoma mantellare Linfoma marginale Linfoma linfoplasmocitoide Linfoma a grandi cellule Linfoma di Burkitt
LINFOMA SPLENICO CON LINFOCITI Leucociti normali VILLOSI CIRCOLANTI o poco aumentati Linfoma marginale splenico CD19 ++ Lieve anemia e piastrinopenia
CD5-
No monocitopenia
CD22 ++
Splenomegalia (polpa bianca)
CD20++ CD23 – CD10CD38 -/+ CD25 -/+ CD11c-/ + CD103 Kappa/Lambda Igs intensa
d(7q31) t(11;14)
FASE LEUCEMICA DI LINFOMA FOLLICOLARE
FASE LEUCEMICA DI LINFOMA FOLLICOLARE
Igs intensa; CD5 -, CD19+,CD22 +; CD43-,CD23-,CD25CD10 +,CD38-/+,CD11cKappa o Lambda t(14;18) (q32;q21)
Leucocitosi moderata , a volte elevata Linfoadenopatie asintomatiche
FASE LEUCEMICA DI LINFOMA MANTELLARE B immaturi,vergini,precentro germinativo
Forma classica
Variante blastoide
FASE LEUCEMICA DI LINFOMA MANTELLARE Forma classica CD19 ++ CD5 ++ CD23 CD22 ++ CD20++
Variante blastoide
CD43 -/+ Kappa/Lambda Igs moderata
t(11;14) q13;q32 Linfoadeno e splenomegalia Febbre,calo ponderale,sudorazione
Ciclina D1
FASE LEUCEMICA DI LINFOMA MARGINALE (linfoma a cellule B monocitoidi) Rara invasione s.periferico Polimorfismo dei linfociti
CD19+ CD5CD10CD25CD11c+ CD43+
LINFOMA LINFOPLASMACITICO e MACROGLOBULINEMIA di WALDENSTROM Leucociti nella norma Banda monoclonale Anemia e neutropenia (nel Waldestrom)
SmIg – CyIg ++ CD19-/+ CD5CD10CD23CD20+ CD22+, CD79a+ CD10-/+ CD25-/+ CD38+dim CD138-/+
t(9;14)
FASE LEUCEMICA DI LINFOMI DIFFUSI A GRANDI CELLULE • Molto rara, soprattutto all’esordio • Cellule pleomorfe, con abbondante citoplasma basofilo, nucleo rotondo o, più spesso, irregolare o lobulato • Criteri citochimici, immunologici e molecolari sono utili per la D.D. con la leucemia monoblastica
immunoblasti
centroblasti
Linfoma non Hodghin a grandi cellule B leucemizzato (B maturi con diverso grado di differenziazione) IgS+ CD19+ CD79a+ CD20+ CD5+, CD10+ CD30+ BCL6 t(3;14)
Linfoadenomegalie Leucemizzazione nella fase terminale
IgS + CD19+ CD20++ CD22++ CD5CD79a+ CD79b+ CD10+
FASE LEUCEMICA DI LINFOMA DI BURKITT
t(8,14) MYC t(2;8) t(8;22)IgI Forma endemica, africana (EBV,malaria) Forma sporadica (europa,nord america) Forma con infezione HIV+
LEUCEMIA A PLASMACELLULE (>20% delle cellule circolanti/>2x109/L)
LEUCEMIA A PLASMACELLULE Mieloma leucemizzato
Igs assente , Igc + ,CD45 -,CD19 -,CD20 - ,CD22 - , FMC7 CD23 -,CD25 - ,CD56+, CD38 ++, CD138 ++,CD10+/-,CD117+
t(11;14) t(4;14) cariotipo iper o ipodiploide delezioni 13q-,17p-,1ptrisomia 1.18,6,9,15
LEUCEMIA A PLASMACELLULE Epato,spleno,linfoadeno De novo megalie
Igs assente Igc +
Leucocitosi,anemia,
CD19 -
piastrinopenia
CD20+ +
CD45-
CD56CD38 ++ CD138 ++ CD117-
t(11;14) cariotipo no iperdiploide trisomia 1,trisomia 18 monosomia 1 monsomia 13 monosomia X
2008 WHO Classification of (LAL) B orT or NK-Precursor-Cell Neoplasms Neoplasie Linfoblastiche/Linfomi B con anomalie genetiche ricorrenti Neoplasie Linfoblastiche /Linfomi NOS ( FAB-L1 o FAB-L2) Neoplasie Linfoblastiche/Linfomi T Neoplasie Linfoblastiche/Linfomi NK Neoplasie Linfoblastiche/Linfoma correlate a terapie
FAB L1
L2
L3
Esame morfologico: “ancora un cardine nella diagnosi di leucemia” G. Basso
2008 WHO Classification of AML • Acute myeloid leukemia (AML) with recurrent genetic abnormalities • AML with myelodysplasia related changes • Therapy-related myeloid neoplasms • AML, not otherwise specified • Myeloid proliferations related to Down syndrome • Myeloid sarcoma • Blastic plasmocytoid dendritic cell neoplasm
Percorso diagnostico • Emocromo e citogramma • Morfologia :sangue periferico , aspirato midollare,(biopsia osteomidollare) • (Citochimica) • Immunofenotipo :s.p,asp.mid.,liquor, liquido pleurico….. • Istologia (bom) • Analisi cromosomica • Analisi molecolare
Percorso diagnostico • Emocromo e citogramma • Morfologia :sangue periferico , aspirato midollare,(biopsia osteomidollare) • (Citochimica) • Immunofenotipo :s.p,asp.mid.,liquor, liquido pleurico….. • Istologia (bom) • Analisi cromosomica • Analisi molecolare
CONTAGLOBULI di ultima generazione
Dott V.Rocco
•Nella CONTA delle cellule gli strumenti sono estremamente più ACCURATI e PRECISI dell’uomo •Nell’ interpretazione, valutazione al M.O. e stesura del REFERTO l’uomo rimane insostituibile
C e l l S i z e
Peroxidase Activity in the Cytoplasm
C e l l S i z e
Nuclear Shape and Density
Percorso diagnostico • Emocromo e citogramma • Morfologia :sangue periferico , aspirato midollare,(biopsia osteomidollare) • (Citochimica) • Immunofenotipo :s.p,asp.mid.,liquor, liquido pleurico….. • Istologia (bom) • Analisi cromosomica • Analisi molecolare
P6D1 P6 D1
P6 D1
LAM-M3v
LAM-M3
CD13+,CD33+, HLA-DR-,CD9+,CD68+
AML-M3
AML-M3v
t(15;17)(q22;q21) PML-RARalfa
LAM-M4
Anni 4 LAM M7 NON CROMOSOMOPATIA S.P. blasti 12%
LAM M7 Dott.R.Mazzone
Anni 90 LAM M7 S.P. blasti 27%
CD41+
LAM M7
Sangue periferico
D1
P2
Aspirato midollare
P2 D1
LAM-M2
P2D1
S.P.
A.M.
P0 D1
P0D1
LAM-M5
AML
T-ALL peripheral blood
Aspirato midollare Blasti in pregresso SLVL
Percorso diagnostico • Emocromo e citogramma • Morfologia :sangue periferico , aspirato midollare,(biopsia osteomidollare) • (Citochimica) • Immunofenotipo :s.p,asp.mid.,liquor, liquido pleurico….. • Istologia (bom) • Analisi cromosomica • Analisi molecolare
FLUOROCROMO
ANTICORPO
ANTIGENE
FLUOROCROMO
ANTICORPO
ANTIGENE
CITOMETRIA A FLUSSO E’ UN METODO DI SCELTA PER: • INDIVIDUARE LA LINEA CELLULARE • INDIVIDUARE LO STADIO MATURATIVO DELLA CELLULA • INDIVIDUARE L’EVENTUALE CLONALITA’ • INDIVIDUARE FENOMENI DI ETEROGENEITA’ FENOTIPICA • QUANTIFICARE LE CELLULE EMOPOIETICHE
SCELTA DEI MONOCLONALI DA UTILIZZARE • PANELLO AD AMPIO SPETTRO • PANELLO DI MINIMA SEGUITO DA UN PANELLO PIU’ APPROFONDITO • PANELLO SELEZIONATO DOPO ESAME MORFOLOGICO E NOTIZIE CLINICHE
flow-cytometry in acute leukemia lineage definition specific
sensitive
AML
cMPO
CD13/CD33
B-lineage ALL
cCD79a
CD19
T-lineage ALL
cCD3
CD7
LA LOGICA APPLICATA ALLA DIAGNOSI
La diagnosi di leucemia acuta è una delle rare condizioni in cui il laboratorio è l’attore principale della diagnosi, talora anche indipendentemente dalla clinica. Infatti non fornisce solo dei risultati da interpretare, ma anche una interpretazione degli stessi, guidando l’approccio terapeutico
Prof. Basso (PD)
Normale
Aspirato midollare patologico
CD41+
Percorso diagnostico • Emocromo e citogramma • Morfologia :sangue periferico , aspirato midollare,(biopsia osteomidollare) • (Citochimica) • Immunofenotipo :s.p,asp.mid.,liquor, liquido pleurico….. • Istologia (bom) • Analisi cromosomica • Analisi molecolare
Immunoistochimica MPO
MPO
MPO
CD79a
L’analisi citogenetica fornisce indicazioni relativamente a:
- Diagnosi - Prognosi
Condiziona le scelte terapeutiche Contribuisce alla verifica della risposta alla terapia - Segnala l’evoluzione della patologia
Diagnostic Algorithms Attilio Orazi, MD, FRCPath. (Engl.) Weill Cornell Med Center, New York, NY -- USA
Algorithmic Approach Morphologic Review
>20% Blood or Marrow Blasts
<20% Blood or Marrow Blasts
Algorithmic Approach in AML >20% Blood or Marrow Blasts
Immunophenotype
Mixed?
Myeloid
Precursor B
Precursor T
Algorithmic Approach in AML >20% Blood or Marrow myeloid blasts [blast cut-off not required for t(8;21), inv(16), t(16;16), t(15;17), Down syndrome, or AEL]
History and Genetics
Down syndrome
Hx of cytotoxic therapy
Therapyrelated AML
Myeloid proliferation of Down Syndrome
None
Morphology for multilineage dysplasia
Prior MDS or Absent MDS-related Present cytogenetics NPM1 or CEBPA Recurrent + mutated genetic abnormality AML with myelodysplasia-
related changes AML with recurrent genetic abnormality
AML, not otherwise specified
Nuovi marker molecolari FLT3 recettore
tirosin –chinasi,presente sulla superficie dei progenitori ematopoietici ed è fondamentale per la sopravvivenza e differenziazione delle cellule.Nel 30% di LAM si osserva mutazione di FLT3 ITD associata a leucocitosi ed alto numero di blasti
WT1 (Wilms tumor 1)
è una proteina con probabile funzione di oncosoppresione,correlata a molte forme leucemiche,il suo mRNA è espresso a bassi livelli nell’individuo sano,iper-epresso nel pz. leucemico. Diventa quindi fondamentale,oltre che per la diagnosi,come marker prognostico , nel follow-up del pz,in tutti i casi di leucemia,anche nei pz privi di alterazioni citogenetiche e molecolari evidenti.
NPM1 (nucleofosmina) -60% delle LMA con cariotipo normale hanno
mutazioni somatiche nell’esone 12 del gene NPM1 -si localizza in maniera atipica nel citoplasma delle cellule atipiche (NPM1c+) -le mutazioni di NPM1 isolate si associano a migliore risposta alla terapia. -le mutazioni del gene NPM1 associate con mutazioni del gene FLT3-ITD hanno una prognosi sfavorevole -le mutazioni del gene NPM1 possono essere identificate attraverso metodiche diverse:sequenziamento,RTPCR,ASO-RT-PCR,cromatografia liquida,elettroforesi capillare,immunoistochimica,westernblot, immunofluorescenza,citometria a flusso con anticorpi specifici(T26)
CEBPA: Gene che codifica fattore di trascrizione WHO 2008 :AML con mutazione CEBPA,in assenza di altre mutazioni E’ spesso associata a AML-M1,meno frequente in AML-M2.M4,M5. Coespressione CD7 Correla con una buona prognosi (di piu’ se è assente la mutazione FLT3-ITD) 4% delle AML con cariotipo normale hanno mutazioni di CEBPA e NPM1.
Le Sindromi Mielodisplastiche • Un gruppo eterogeneo di malattie neoplastiche clonali della cellula staminale ematopoietica • Incidenza — al di sopra di 60 anni, 0.75/1000/anno • Caratteristiche – Displasia – Emopoiesi inefficace
Sindromi Mielodisplastiche • Caratteristiche – Midollo ― cellularità normale o aumentata – Citopenia
• Ci può essere un aumento nel numero dei blasti • Infrequente cellularità ridotta • Qualche volta conteggi aumentati
Sindromi Mielodisplastiche (WHO 2008) *Citopenia refrattaria con displasia unilineare (CRDU) anemia refrattaria (AR),neutropenia refrattaria (NA),piastrinopenia refrattaria (PR) (blasti s.p.<1%;blasti a.m. <5%) *Anemia refrattaria con sideroblasti ad anello (ARSA) (blasti s.p. assenti;blasti a.m. <5%,sideroblasti>15%) *Citopenia refrattaria con displasia multilineare (CDRM) (blasti s.p.<1%;blasti a.m.<5%,assenti corpi di auer) *Anemia refrattaria con eccesso di blasti 1 (AREB1) ( blasti s.p.<5%; >5%blasti a.m. <9%,assenti auer,monociti<1000 *Anemia refrattaria con eccesso di blasti 2 (AREB2) (>5%blasti s.p. <19%; >10%blasti a.m. <19%,auer presenti *Sindrome mielodisplastica non classificata (SMD-NC) (blasti<1% s.p.; blasti<5%a.m.) *Sindrome mielosisplastica associata a del (5q) isolata (SMD 5q-) blasti<1% s.p.;blasti <5% a.m.,auer assenti,megacariociti ipolobulati) *Citopenia refrattaria del bambino (CR-B) (blasti <2%s.p.;blasti<5% a.m.
C’è stato chemioterapia/radioterapia? No
Sì
t-SMD
Ci sono 5-19% di blasti nel SP o 10-19% di blasti nel MO o corpi di Auer? Si Yes RAEB-II
No No Continuate
Blasti nel SP sono meno di 5% e nel MO tra il 5-9%? C’è 5q– solo? Sì
AREB-1
No Sindrome di 5q– C’è displasia multilineare?
Sì CRDM o CRDM-S
No CR o RARS
Neoplasie Mieloproliferative (WHO 2008) ________________________________________________________________ • Leucemia Mieloide Cronica BCR-ABL1 positiva (CML) • Leucemia Neutrofila Cronica (CNL) • Policitemia Vera (PV) • Mielofibrosi Primaria (PMF) • Trombocitemia Essenziale (ET) • Leucemia Eosinofila Cronica (CEL NOS) • Mastocitosi • Meoplasie Mieloproliferative Inclassificabili (MPN-U)
MDS/MPN (WHO 2008) • Leucemia Mieloide Cronica Atipica (aCML) • Leucemia Mielomonocitica Cronica (CMML) • Leucemia Mielomonocitica Cronica Giovanile (JMML) • Neoplasie MDS/MPN non classificabili (MDS/MPN-U) Entità Provvisoria: ARSA-t
PRIMO CASO CLINICO:
DONNA 62 ANNI PRONTO SOCCORSO 30/07/2010 (venerdi’ pomeriggio!) MARCATA ASTENIA FEBBRE D.Tanca
Formula al M.O. Neutrofili: Linfociti: Monociti: Eosinofili: Basofili: Blasti:
47% 31% 5% 2% 0% 15%
Striscio periferico: Marcata displasia dei neutrofili; CD34+,CD117+,HLA-DR+CD33+,CD19+ 15%blasti mieloidi di medie/grandi dimensioni,in alcuni presente unico corpo di Auer. LAM-M2 Confermata piastrinopenia
Aspirato midollare
Morfologico aspirato midollare Campione pervenuto ricco di piccoli frustoli;ipercellulare. Serie mieloide marcatamente displastica;presenti neutrofili ipo/agranulati. Blasti mieloidi >30% della popolazione non eritroide,alcuni con unico corpo di Auer. Ipoplasia serie eritroide. Megacariociti assenti. Orientamento diagnostico: LAM-M2.
CD33+,CD19+
Immunofenotipo: Displasia della serie mieloide Blasti>20% CD34+,CD117+,CD33+,CD13+,CD38+, HLA-DR+,CD16-,CD14-,CD66b-,CD11bCD19+,3%CD7+ e CD56+. t (8;21) ?
CITOGENETICA conferma t (8;21)
2008 WHO Classification of AML • Acute myeloid leukemia (AML) with recurrent genetic abnormalities • AML with myelodysplasia related changes • Therapy-related myeloid neoplasms • AML, not otherwise specified • Myeloid proliferations related to Down syndrome • Myeloid sarcoma • Blastic plasmocytoid dendritic cell neoplasm
SECONDO CASO CLINICO:
UOMO DI 61 ANNI AMBULATORIALE 28/02/2006
D.Tanca
Striscio periferico :morfologico compatibile con LMC LDH 1185 U/L Score FAL 10 No splenomegalia Fish:t(9;22) senza delezioni dei geni ABL e BCR coinvolti nella traslocazione;cromosoma Ph+ Terapia con Glivec;remissione.
S.P. : 40% blasti (MPO -)
56% blasti CD45low,CD34+,CD33+CD13+low,CD19+
CD45low,CD34+,CD33+, CD13+low,HLA-DR+,CD19+ .
Aspirato midollare
Aspirato midollare
80% blasti
Analisi molecolare del gene BCR/ABL: valore BCR-ABL/ABLx quantitativo:33.85% Analisi mutazionale del gene Abl: nessuna evidenza di mutazione puntiforme Cariotipo: 46,xy,t(9;22)(q34,q11),-7.+ring Conclusioni: Tutte le metafasi analizzate presentano oltre il cromosoma Ph,monosomia del cromosoma 7 ed un ring di probabile derivazione del 7.
Conclusioni diagnostiche: LMC in evoluzione blastica da probabile trasformazione di una cellula progenitrice multipotente Leucemia “ibrida” ,”ambigua”,con blasti mieloidi e linfoidi, o LAL?
Essendo blasti cMPO -, è stato inquadrado come LMC in evoluzione LAL Ph+ con coespressione di marcatori mieloidi
Resistenza al dasatinib iniziata chemioterapia
Inviato al trapianto Remisione molecolare
TERZO CASO CLINICO:
UOMO 80 ANNI AMBULATORIALE LUGLIO 2010 SLVL D.Tanca
SLVL
Ottobre 2011
Aspirato midollare
Sangue periferico
CD 34+,CD33+,CD38+ CD117- CD13-,HLA-DRcMPO? cCD3?,cCD79a ?
Aspirato midollare
IMMUNOFENOTIPO SANGUE PERIFERICO CD 34+,CD33+,CD11b+,CD38+ CD117-,CD13-,HLA-DR-,CD14-,CD16-,CD10CD5+,CD7+ ,CD2- ,CD56-, TdTcMPO?, cCD3?,cCD79a ?
ASPIRATO MIDOLLARE CD 34+,CD33+,CD11b+,CD38+,CD11c+,CD81+ CD117+,CD13?,HLA-DR+,CD14-,CD16+,CD10CD5+,CD7+, CD2-, CD56-, TdTcMPO+ (8%),c CD3?,cCD79a ?
BOM FRUSTOLO MIDOLLARE RAPPRESENTATO,CON SOSTITUZIONE ADIPOSA DEL 10%, RETICOLO ARGENTAFFINE MODICAMENTE E FOCALMENTE ADDENSATO (MF2). LA SERIE NATIVA ERITROIDE E’ MODERATAMENTE RIDOTTA, QUELLA MEGACARIOCITARIA MARCATAMENTE RIDOTTA ED INTERPOSTI SONO PRESENTI LINFOCITI DI PICCOLA TAGLIA A FENOTIPO SIA B CHE T. IL MIDOLLO E’ AMPIAMENTE SOSTITUITO DALLA PROLIFERAZIONE DI ELEMENTI BLASTICI LCA+, MORFOLOGICAMENTE E FENOTIPICAMMENTE RIFERIBILI ALLA SERIE MIELOIDE, CHE ESPRIMONO MIELOPEROSSIDASI CON INTENSITA’ +++ NEL 30% DELLA POPOLAZIONE, CON INTENSITA’ + NELLA RESTANTE. CD68 FOCALMENTE POSITIVO CON ASPETTO RETICOLARE. TALI ELEMENTI BLASTICI ESPRIMONO CD34 NEL 90% DELLA POPOLAZIONE PROLIFERANTE E CD117 NEL 70%. I BLASTI RISULTANO NEGATIVI PER CD3,CD5,CD20,CD79a,CD138,CD4,CD8. IL QUADRO MIDOLLARE SUGGERISCE UNA LEUCOSI ACUTA INDIFFERENZIATA CON ELEMENTI A FENOTIPO MIELOIDE
MPO IMMUNOISTOCHIMICA
MPO
MPO
MPO
CD79a
CITOGENETICA TIPO DI ESAME: CARIOTIPO DA PRELIEVO DI SANGUE MIDOLLARE NON STIMOLATO METODICA UTILIZZATA:COLTURA A 24 ORE CON METAFASI SPONTANEE.Q-BANDING RISOLUZIONE BANDE.300-350 NUMERO METAFASI OSSERVATE.15 CARIOTIPO: 90,XXYY,COMPLESSO
CONCLUSIONI:CARIOTIPO “NEAR TETRAPLOIDE” CON NUMEROSI RIARRANGIAMENTI NUMERICI E STRUTTURALI (AD ESEMPIO DUPLICAZIONE PARZIALE DEL BRACCIO LUNGO DI UN CROMOSOMA 1)
Neoplasia Acuta Mieloide altamente indifferenziata
2008 WHO Classification of AML • Acute myeloid leukemia (AML) with recurrent genetic abnormalities • AML with myelodysplasia related changes • Therapy-related myeloid neoplasms • AML, not otherwise specified (LAM-0) • Myeloid proliferations related to Down syndrome • Myeloid sarcoma • Blastic plasmocytoid dendritic cell neoplasm
Febbraio 2012
QUARTO CASO CLINICO:
UOMO 64 ANNI ESTERNO 09/03/2012 (venerdi’ sera!) MARCATO DIMAGRIMENTO D.Tanca
Sangue periferico
Aspirato midollare:blasti>30%
Sangue periferico
2%BLASTI CD34+ CD33+,CD13+,CD117+,MPO+ Aspirato midollare
Citogenetica negativa
2008 WHO Classification of AML • Acute myeloid leukemia (AML) with recurrent genetic abnormalities • AML with myelodysplasia related changes • Therapy-related myeloid neoplasms • AML, not otherwise specified (LAM-M1) • Myeloid proliferations related to Down syndrome • Myeloid sarcoma • Blastic plasmocytoid dendritic cell neoplasm
QUINTO CASO CLINICO:
DONNA 74 ANNI PRONTO SOCCORSO 12/03/2013 MARCATO ASTENIA,FEBBRE PANCITOPENIA D.Tanca
Sangue periferico
Striscio periferico
Aspirato midollare
Aspirato midollare
Sangue periferico
Aspirato midollare
CD45low,CD34+,CD56+,CD4+,CD123+
CITOGENETICA Cariotipo:43-44,XX,ipodiploide clonale complesso Le metafasi osservate presentano cariotipo ipodiploide clonale complesso. Si osserva un marker acrocentrico e Uno o due frammenti apparentemente acentrici
2008 WHO Classification of AML • Acute myeloid leukemia (AML) with recurrent genetic abnormalities • AML with myelodysplasia related changes • Therapy-related myeloid neoplasms • AML, not otherwise specified (LAM-M1) • Myeloid proliferations related to Down syndrome • Myeloid sarcoma • Blastic plasmocytoid dendritic cell neoplasm
Grazie per l’attenzione !!!